今天探索吧就给我们广大朋友来聊聊nbt染色方法,以下关于观点希望能帮助到您找到想要的答案。
用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质和分离乳酸脱氢酶同工酶有哪些相同之处和不同之处
最佳答案没什么大的不同吧,乳酸脱氢酶同工酶也是蛋白质。但是不同的蛋白质电泳的凝胶的配置和染色方法是有差异的,比如乳酸脱氢酶同工酶的制胶方法和染色方法是:
⑴、制胶方法:
分离胶(7.5%)
分离胶缓冲液:3 mL
分离胶贮液: 6 mLl
0.14%过硫酸铵 12 mL
水:3 mL
TEMED :15 uL
配制方法:
0.3% H2O2:1 mL 30% H2O2,加重蒸水至100 mL。
浓缩胶(2.5%)
浓缩胶缓冲液:1.5 mL
浓缩胶贮液:3 mL
核黄素:1.5 mL
蔗糖:6 mL
TEMED:18 uL
配制方法:
0.3% H2O2:1 mL 30% H2O2,加重蒸水至100 mL。
⑵、染色方法:
染色液:NAD+: 0.05g
NBT: 0.03g
PMS: 0.002g
1 mol/L乳酸钠液(pH7.0):10 mL
0.1 mol/L氯化钠:5 mL
0.5 mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.1):15 mL
水:70 mL
显色:将电泳后凝胶板浸入染色液,于37℃保温30~60分钟,即可显示蓝紫色区带。可用无离子水漂洗,再用7%醋酸固定,以终止酶促反应。
NBT法测定SOD中Met缓冲液和EDTA缓冲液有什么作用?
最佳答案从该方法原理上可解释这个问题:
该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在氧气中,还原的核黄素与氧反应产生O2-,O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色,SOD通过催化O2-歧化反应,生成O2与H2O2,从而抑制蓝色形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。
核黄素发生还原反应,需要体系中提供一定的电子供体,而甲硫氨酸就起到了这个电子供体作用,使得核黄素的光激发还原反应得以进行。
NBT光还原法的结论如何写
最佳答案从该方法原理上可解释这个问题:
该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小.在氧气中,还原的核黄素与氧反应产生O2-,O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色,SOD通过催化O2-歧化反应,生成O2与H2O2,从而抑制蓝色形成.于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高.
核黄素发生还原反应,需要体系中提供一定的电子供体,而甲硫氨酸就起到了这个电子供体作用,使得核黄素的光激发还原反应得以进行.
nbt试剂能把细胞染成什么颜色
最佳答案nbt试剂能把细胞染成蓝色。
氯化硝基四氮唑蓝 (NBT)
中文别名:硝基蓝四氮唑,硝基氯化四氮唑蓝NBT,氯化硝基四氮唑兰,硝基四氮唑蓝
英文名称: Nitrotetrazolium Blue chloride
英文别名: NBT,p-Nitro-Blue tetrazolium chloride,Nitro BT
线性分子式: C40H30Cl2N10O6
纯度: 98%
CAS号: 298-83-9
分子式: C40H30N10O6·2Cl
分子量: 817.60
用途:
脱氢酶和其它过氧化酶的底物。用于测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase);也是凝血因子I(fibrinogen)的沉淀试剂。
也是碱性磷酸酶底物之一,在碱性磷酸酶的催化下生成不溶性的蓝色产物。常用于免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和蛋白印迹(WB)等实验。
NBT可作为一种筛查尿道感染的方法。氯化硝基四氮唑蓝(NBT)还原法对血清糖化低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白(SG LP-V P)进行测定,依据呈色的深浅直接用光密度表示SG LP-V P的浓度,并计算SG LP-V P的指数,取得的效果非常好。
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