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微透析方法学——透析,微滤,超滤,纳滤,反渗透,电渗析,渗透气化等膜分离技术各自的特点

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今天探索吧就给我们广大朋友来聊聊微透析方法学,以下关于观点希望能帮助到您找到想要的答案。

透析,微滤,超滤,纳滤,反渗透,电渗析,渗透气化等膜分离技术各自的特点

透析,微滤,超滤,纳滤,反渗透,电渗析,渗透气化等膜分离技术各自的特点

1.透析(dialysis)是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理;

2.微滤适用于细胞、细菌和微粒子的分离,在生物分离中,广泛用于菌体的分离和浓缩,目标物质的大小范围为0.01-10 μm,一般用于预处理;

3.超滤技术的优点是没有相的转变,无需添加任何强烈的化学物质,可以在低温下操作,过滤较快,便于无菌处理等,一般用于预处理;

4.纳滤 特点是能截留小分子的有机物并可同时透析出盐,集浓缩与透析于一体;

操作压力低,因为无机盐能通过纳米滤膜而透析,使得纳米过滤的渗透压远比反渗透为低,所以纳米过滤所需的外加压力比反渗透低得多;

5.反渗透法具有设备构型紧凑,占地面积小、单位体积产水量及能量消耗少等优点;

6.电渗析的特点时可以同时对电解质水溶液起淡化、浓缩、分离、提纯作用、可以用于蔗糖等非电解质的提纯,以除去其中的电解质、在原理上,电渗析器是一个带有隔膜的电解池,可以利用电极上的氧化还原效率高;

7.渗透气化对共沸物系和近沸物系等难分物系的分离, 显示特有的优越性。

透析是什么?

透析(Hemodialysis),临床意指血液中的一些废物通过半渗透膜除去。血液透析是一种较安全、易行、应用广泛的血液净化方法之一。透析是指溶质通过半透膜,从高浓度溶液向低浓度方向运动。血液透析包括溶质的移动和水的移动,即血液和透析液在透析器(人工肾)内借半透膜接触和浓度梯度进行物质交换,使血液中的代谢废物和过多的电解质向透析液移动,透析液中的钙离子、碱基等向血液中移动。如果把白蛋白和尿素的混合液放入透析器中,管外用水浸泡,这时透析器管内的尿素就会通过人工肾膜孔移向管外的水中,白蛋白分子较大,不能通过膜孔。这种小分子物质能通过而大分子物质不能通过半透膜的物质移动现象称为弥散。临床上用弥散现象来分离纯化血液使之达到净化目的的方法即为血液透析的基本原理。 血液透析所使用的半透膜厚度为10-20微米,膜上的孔径平均为3纳米,所以只允许分子量为1.5万以下的小分子和部分中分子物质通过,而分子量大于3.5万的大分子物质不能通过。因此,蛋白质、致热原、病毒、细菌以及血细胞等都是不可透出的;尿的成分中大部分是水,要想用人工肾替代肾脏就必须从血液中排出大量的水分,人工肾只能利用渗透压和超滤压来达到清除过多的水分之目的。现在所使用的人工肾即血液透析装置都具备上述这些功能,从而对血液的质和量进行调节,使之近于生理状态。

微透析技术的微透析系统及其特点

微透析系统装置主要由微量泵、微透析探头、收集器、连接管及配套设备组成。

1,微量泵以注射泵为佳,有利于减少恒流泵和蠕动泵的波动, 流速一般为1~5 μl/min。

2,微透析探头有直线性探头、环形探头、同心型探头等不同的类型(微透析管因实验对象不同而形状大小各异);按照探头的形状分为穿颅探头、U型探头、I型探头、环形探头等。目前普遍应用的是同心型探头,微透析探头通常是由一管式半透膜与不锈钢、石英或塑料毛细管构成双层管道; 长度一般为1~10 cm。半透膜由再生纤维素、聚碳酸酯或聚丙烯腈制成, 载留分子量5~10 KD不等。实际应用需根据具体组织和待测物选择不同的微透析探头。

微透析技术最大的优点是可在基本上不干扰体内正常生命过程的情况下进行在体( in vivo)、实时( real time) 和在线(on line) 取样, 特别适用于研究生命过程的动态变化。微透析技术的优点是活体取样、动态观察、定量分析、采样量小、组织损伤轻等。该技术的另一大优点是样品的采集与分析过程既可在位又可离位进行。此外微透析技术的独到之处是可以单独取得细胞外液, 因此可对体内神经递质的释放量进行动态监测, 具有重要的生物学意义。

微透析技术的缺点就是对取出的样品进行准确可靠的校正,主要涉及到对探针的回收率的测定。探针回收率是指从灌流液中流出的待测组分与标准浓度之比的百分数。探针回收率是 影响 微透析结果的重要因素, 取决于取样部位的生物学性质、透析膜的物理性质(材料、孔径、长度及几何形状等)、待测物质的分子量、灌流、压力、生物体本身的健康条件和生物节律等。目前测定回收率的方法主要有以下几种:

1,外标法

计算被测物质相对浓度的变化时, 可简单地采用体外回收率法。测定宜在取样后立即进行, 将探针放入已知浓度的标准溶液中, 用与体内实验相同的流速灌流探针。达到稳定状态后收集灌流液并进行检测。测定浓度与标准溶液浓度之比就是体外回收率。此法虽简单易行, 但由于被测物质在体外时与体内的环境状况不同, 检测结果不能严格地等同于实际的回收率。

2,内标法

往灌流液中加入已知浓度且性质与被分析物质相似的另一种物质做内标,内标物不仅在扩散性质上与被分析物一致,而且还要在体内的代谢过程中也尽可能一致,测出透析率即作为被分析物的回收率。由于选择内标的局限性很大, 限制了此法的应用。

3,反透析法

假设被测物从两个方向通过半透膜是同等的。在灌流液中加入一定浓度的内标物(Cic) ,在与体内透析相同的条件下操作, 测定透析液中内标物的浓度(Cec) ,体内回收率(Rin ,vivo ) 可用下式计算:Rin vivo = (1 Cec/ Cic) ×100 %本法要求内标物具有生物惰性, 尽可能与被测物相似。

如何确定微透析技术获取的为细胞间隙液

细胞与细胞间或细胞与细胞外基质的联结结构称为细胞连接(cell junction).细胞连接的体积很小,只有在电镜下才能观察到.可分为三大类,即:封闭连接(occluding junction)、锚定连接(anchoring junction)和通讯连接(communicating junction).

第一节 细胞连接

一、封闭连接

(一)紧密连接(tight junction)

又称封闭小带(zonula occludens),存在于脊椎动物的上皮细胞间(图11-1),长度约50-400nm,相邻细胞之间的质膜紧密结合,没有缝隙.在电镜下可以看到连接区域具有蛋白质形成的焊接线网络,焊接线也称嵴线(图11-2,3),封闭了细胞与细胞之间的空隙.上皮细胞层对小分子的透性与嵴线的数量有关,有些紧密连接甚至连水分子都不能透过.

紧密连接的焊接线由跨膜细胞粘附分子构成,主要的跨膜蛋白为claudin和occludin,另外还有膜的外周蛋白ZO.

紧密连接的主要作用是封闭相邻细胞间的接缝,防止溶液中的分子沿细胞间隙渗入体内,从而保证了机体内环境的相对稳定;消化道上皮、膀胱上皮、脑毛细血管内皮以及睾丸支持细胞之间都存在紧密连接.后二者分别构成了脑血屏障和睾血屏障,能保护这些重要器官和组织免受异物侵害.在各种组织中紧密连接对一些小分子的密封程度有所不同,例如小肠上皮细胞的紧密连接对Na+的渗漏程度比膀胱上皮大1万倍.

图11-1紧密连接位于上皮细胞的上端

图11-2兔子上皮细胞的紧密连接(冰冻蚀刻)

图11-3 紧密连接的模式图

(二)间壁连接(septate junctions)

是存在于无脊椎动物上皮细胞的紧密连接(图11-4).连接蛋白呈梯子状排列,形状非常规则,连接的细胞内骨架成分为肌动蛋白纤维.在果蝇中一种叫做discs-large的蛋白参与形成间壁连接,突变品种不仅不能形成间壁连接,还产生瘤突.

图11-4 间壁连接存在于无脊椎动物

二、锚定连接

(一)粘合带与粘合斑

粘合带(adhesion belt)呈带状环绕细胞,一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方(图11-5).在粘合带处相邻细胞的间隙约15~20nm.

图11-5 粘合带位于紧密连接下方

间隙中的粘合分子为E-钙粘素(图11-6).在质膜的内侧有几种附着蛋白与钙粘素结合在一起,这些附着蛋白包括:α-,β-,γ-连锁蛋白(catenin)、粘着斑蛋白(vinculin)、α-辅肌动蛋白(α-actinin)和片珠蛋白(plakoslobin).

图11-6 粘合带结构模型

粘合带处的质膜下方有与质膜平行排列的肌动蛋白束,钙粘蛋白通过附着蛋白与肌动蛋白束相结合.于是,相邻细胞中的肌动蛋白丝束通过钙粘蛋白和附着蛋白编织成了一个广泛的网络,把相邻细胞联合在一起.

粘合斑(adhesion plaque)位于细胞与细胞外基质间,通过整合素(integrin)把细胞中的肌动蛋白束和基质连接起来.连接处的质膜呈盘状,称为粘合斑.

(二)桥粒与半桥粒

桥粒(desmosome)存在于承受强拉力的组织中,如皮肤、口腔、食管等处的复层鳞状上皮细胞之间和心肌中(图11-7).相邻细胞间形成纽扣状结构,细胞膜之间的间隙约30nm,质膜下方有细胞质附着蛋白质,如片珠蛋白(plakoglobin)、桥粒斑蛋白(desmoplakin)等,形成一厚约15~20nm的致密斑.斑上有中间纤维相连,中间纤维的性质因细胞类型而异,如:在上皮细胞中为角蛋白丝(keratin filaments),在心肌细胞中则为结蛋白丝(desmin filaments).桥粒中间为钙粘素(desmoglein及desmocollin).因此相邻细胞中的中间纤维通过细胞质斑和钙粘素构成了穿胞细胞骨架网络(图11-8).

图11-7 桥粒位于粘合带下方

图11-8 桥粒的结构模型

半桥粒(hemidesmosome)在结构上类似桥粒,位于上皮细胞基面与基膜之间(图11-9),它桥粒的不同之处在于:①只在质膜内侧形成桥粒斑结构,其另一侧为基膜;②穿膜连接蛋白为整合素(integrin)而不是钙粘素,整合素是细胞外基质的受体蛋白;③细胞内的附着蛋白为角蛋白(keratin).

图11-9 半桥粒连接上皮细胞基面和基膜

三、通讯连接

(一)间隙连接

间隙连接(gap junction) 存在于大多数动物组织.在连接处相邻细胞间有2~4nm的缝隙(图11-10),而且连接区域比紧密连接大得多,最大直径可达0.3μm.在间隙与两层质膜中有大量蛋白质颗粒,是构成间隙连接的基本单位,称连接子(connexon),由6个相同或相似的跨膜蛋白亚单位环绕而成,直径8nm,中心形成一个直径约1.5nm的孔道(图11-11).通过向细胞内注射分子量不同的染料,证明间隙连接的通道可以允许分子量小于1.5KD的分子通过.这表明细胞内的小分子,如无机盐离子、糖、氨基酸、核苷酸和维生素等有可能通过间隙连接的孔隙.

间隙连接的通透性是可调节的.在实验条件下,降低细胞PH值,或升高钙离子浓度均可降低间隙连接的通透性.当细胞破损时,大量钙离子进入,导致间隙连接关闭,以免正常细胞受到伤害.

图11-10 间隙连接电镜照片

图11-11 左,连接子电镜照片;右,间隙连接模型

间隙连接的功能包括:

1.参与细胞分化:胚胎发育的早期,细胞间通过间隙连接相互协调发育和分化.小分子物质即可在一定细胞群范围内,以分泌源为中心,建立起递变的扩散浓度梯度,以不同的分子浓度为处于梯度范围内的细胞提供”位置信息”(positional information),从而诱导细胞按其在胚胎中所处的局部位置向着一定方向分化.

2.协调代谢:例如,在体外培养条件下,把不能利用外源次黄嘌呤合成核酸的突变型成纤维细胞和野生型成纤维细胞共同培养,则两种细胞都能吸收次黄嘌呤合成核酸.如果破坏细胞间的间隙连接,则突变型细胞不能吸收次黄嘌呤合成核酸.

3、构成电紧张突触:平滑肌、心肌、神经末梢间均存在的这种间隙连接,称为电紧张突触(electrotonic synapses).电紧张突触无须依赖神经递质或信息物质即可将一些细胞的电兴奋活动传递到相邻的细胞.

(二)胞间连丝

胞间连丝(plasmodesmata)是植物细胞特有的通讯连接.是由穿过细胞壁的质膜围成的细胞质通道,直径约20~40nm.因此植物体细胞可看作是一个巨大的合胞体(syncytium).通道中有一由膜围成的筒状结构,称为连丝小管(desmotubule).连丝小管由光面内质网特化而成,管的两端与内质网相连.连丝小管与胞间连丝的质膜内衬之间,填充有一圈细胞质溶质(cytosol).一些小分子可通过细胞质溶质环在相邻细胞间传递(图11-12).

图11-12 胞间连丝结构模型

胞间连丝在功能上与动物细胞间的间隙连接类似,它允许分子量小于800Da的分子通过,在相邻细胞间起通讯作用.但通过胞间连丝的分子运输也要受到调节.实验证明,在胞间连丝正常的情况下,有些低分子量的染料分子却不能通过.然而某些植物病毒能制造特殊的蛋白质,这种蛋白质同胞间连丝结合后,可使胞间连丝的有效孔径扩大,使病毒粒子得以通过胞间连丝在植物体内自由播散和感染.

胞间连丝还对细胞分化起一定作用.在高等植物中,顶端分生组织的细胞分化与胞间连丝的分布有着相应的关系.随着细胞的生长和延长,侧壁上的胞间连丝逐渐减少,而横壁上的却仍保持很多.植物相邻细胞间的细胞核可经胞间连丝穿壁.

(三)化学突触

化学突触(synapse)是存在于可兴奋细胞间的一种连接方式,其作用是通过释放神经递质来传导兴奋.由突触前膜(presynaptic membrane)、突触后膜(postsynaptic membrane)和突触间隙(synaptic cleft)三部分组成(图11-13、14).

图11-13 化学突触的结构(具有小囊泡的一侧为突触前膜)

突触前神经元的突起末梢膨大呈球形,称突触小体(synaptic knob).突触小体贴附在突触后神经元的胞体或突起的表面形成突触.突触小体的膜称突触前膜,与突触前膜相对的胞体膜或突起的膜称突触后膜,两膜之间称为突触间隙.间隙的宽度约20-30nm,内含有粘多糖和糖蛋白等物质.

突触小体内有许多囊泡,称突触小泡(synaptic vesicle),内含神经递质.当神经冲动传到突触前膜,突触小泡释放神经递质,为突触后膜的受体接受(配体门通道),引起突触后膜离子通透性改变,膜去极化或超极化.

透析的原理是什么

主要原理是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。

医学上的透析大致分为三大类:血液透析、腹膜透析、结肠透析。

1、血液透析

血液透析是一种成熟的人工肾脏支持系统。其治疗的原理主要就是根据膜平衡原理,即当半透膜两侧的溶液离子浓度和(或)压力存在差异时,可发生离子和水分通过半透膜的交换。

在血液透析时,半透膜的一侧是血液、另一侧是透析液,由于血液中存在较多尿毒症毒素,而透析液中没有毒素,因此毒素就从血液一侧渗透到透析液一侧,从而清除毒素,同时通过增加透析液的渗透压或采用一个负压,则可以使水分从血液中流动到透析液中而被清除。

2、血液透析

腹膜透析的原理是利用人体自身的腹膜作为半透膜进行透析治疗。腹膜透析时向腹腔内注入透析液,借助腹膜一侧的毛细血管内血浆和另一侧的腹膜腔内透析液两者之间的溶质浓度差异和渗透梯度,通过弥散和渗透原理来清除体内的毒素和蓄积的水分。

3、结肠透析。

结肠透析通过全结肠清洗,使积存在肠道壁上的毒素、肠源性内毒素等有害物质清除出人体,并建立起一个清洁、有效的结肠内环境,更可避免口服抗生素所引起的肠道菌群比例失调。

再充分利用结肠粘膜的生物半透膜特性及天然广阔的透析面积,通过结肠透析的方法,来主动排出身体中的内毒素,则可达到血液净化的目的,从而取得更好的治疗效果,又可较好地调整机体水、电解质和酸碱平衡。

扩展资料:

人体腹腔里的腹膜表面积接近人的体表面积,腹膜上含有丰富的血管和血液供应。每天,血液经过腹膜上的血管不停地循环流动。当把透析液注入到腹腔进行腹膜透析时,腹膜上的血管就暴露在透析液中。

过量的水份和废物就会通过具有成百万个小孔的半透膜而进入到透析液里,几个小时后再把含有水份和废物的透析液排出来,再放入新的透析液,如此不断地循环重复,从而达到清洁血液的目的。

多余的水份和废物是以弥散和渗透的方式通过半透膜进入到透析液中。

以腹膜为半透膜,物质从高浓度一侧(血液)转移到低浓度一侧(透析液),直至两侧物质浓度相等的过程叫弥散作用。如血液比新鲜的透析液含有更多的钠、钾、钙等,这些微小物质就会从血液里通过腹膜以弥散的作用进入到透析液里。

血液里大多数毒素包括肌酐和尿素氮主要是通过弥散的作用进入到透析液里。而当两侧物质浓度相等时,弥散作用就会停止,这就是为什么每隔 4-6 小时要更换新的透析液的原因。

渗透作用的原理,比如把西红柿切半撒上糖,一会就会有水渗出来。腹透就是用透析液的“糖水”通过腹膜把血液里多余的水份拉出来,此过程叫渗透作用。透析液葡萄糖浓度越高,同样时间里从血液里渗透出多余水份越多。从血液里渗透出多余的水分就叫“超滤量”。

参考资料来源;百度百科-透析

参考资料来源:百度百科-半透膜

LC-MS法 是什么

高效液相色谱是一种准确度高,分离范围广的快速分离方法,它对化合物的结构破坏性小,适合有机分子和生物分子的分离。质谱具有其他分析方法无可比拟的灵敏度,对于未知化合物的结构分析定性十分准确,对相应的标准样品要求也比较低。质谱可以和气相联用如GC/MS,也可以和高效液相色谱联用如HPLC/MS。由于色谱和质谱灵敏度相当,再加上分离效果很好的色谱可以作为质谱的进样系统,质谱作为色谱的鉴定仪快,分离好,应用广。色谱-质谱联用成为最好的用于分析微量有机混合物的仪器。

在1970年后,质谱-质谱法(mass separetion-mass spectra Characterization)迅猛发展起来。这种方法让母离子进一步裂解,从而获得裂解过程和分子结构的信息,通常我们称为串联质谱,二维质谱法,序贯质谱等。

我们知道,质谱的分析建立在物质离子化的基础上,按照荷质比分离离子,通过测量离子谱峰的强度实现分析目的。通过色谱纯化后的样品气化离子化形成的离子在电场和磁场的综合作用下,按照质量数和电荷数的比值大小依次排列成谱被记录下来。常见的质谱图的纵坐标是离子信号强度,横坐标就是离子核质比。在液相色谱质谱中通常所用的离子源有ESI和APCI,我们常用的是ESI。ESI 是比APCI软电离程度较小的电离方式,应用范围较APCI 的大,只有少部分有机分子ESI 做不出,可以用APCI 辅助解决问题。 一般用ESI 和 APCI 搭配使用比 ESI 和APCI 的应用范围更广一些。

ESI 和APCI通常产生(M+H)+或(M-H)-等准分子离子,源参数调整简单,容易使用,仪器灵敏度高。对APCI源来说,不足就是给出的结构信息有限,样品易发生热裂解,低质量时基线噪声大。ESI通常只产生分子离子峰,可以直接测定混合物,并可以测定热不稳定的极性化合物。其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA 等生物大分子;通过调节离子源电压控制离子的碎裂(源内CID)得到化合物的部分结构。

当然有机质谱也有自身局限性。有机分子多数有异构体,而质谱在立体化学方面区分能力差;色谱的重复性稍微差一些,需要严格控制操作条件,不能像NMR,IR等可以直接动手操作,需要专人负责;质谱有离子源的记忆效应,操作起来也很复杂;尽管如此,色谱-质谱联用在天然产物的分析〔1〕,药物代谢结合物(如苯丙酮尿症PKU)的测定〔2〕,药物合成的监测(如Ractopamine)〔3〕具有重要的应用。美国耶鲁大学教授J.Fenn等1984年首次发表ESI-MS的研究成果,并于1988年成功地进行了蛋白质的分析。

先天性疾病中有很大一部分是先天性遗传代谢疾病,就目前医学发展已经了解的有一百多种。这些疾病虽不致死,但是对患儿的智力和体格可能造成痴呆、残缺和畸形,是家庭、社会、国家的沉重负担。目前有30多种代谢失常遗传性疾病如各种氨基酸代谢失常血症包括同构胱氨酸尿症、瓜氨酸血症、酪氨酸血症、超苯丙氨酸血症、精氨酸酶缺乏症、精氨琥珀酸尿症和各种超甲硫氨酸血症、短链和长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCAD和LCAD)、异戊酸血症、丙酸血症、甲基丙二酸血症、戊二酸血症和其它各种有机酸代谢失常疾病等都可用LC/MS/MS进行临床检测〔4〕。

我们知道,保证药品质量的一个重要方面是杂质检查及限度控制,使用LC/MS/MS可以很方便的对药品进行监控。Nicolas建立了不同批次抗癌药物DuP941的LC/MS/MS谱图达到质量控制目的;Rourick建立了鉴定药品杂质的方法,利用LC/MS/MS功能鉴定头孢羟氨苄降解产物的结构。对分析化学家来说是一个挑战的体内药物分析利用LC/MS/MS也显示很大的优越性。有报道Takeshi对血液和尿液中11个添加的吩噻嗪类药物进行分析,采用SPME和LC分离经MS/MS检测。Wong开展了微透析-LC/MS/MS生物活体分析,将微透析探针插入动物的颈动脉,实时了解松果体素在体内的生化过程和代谢情况。LC/MS/MS还可以鉴别体液中很多药物,这在很多文献中都有报道〔5,6〕。

LC/MS/MS也用于生物技术中分子量的测定〔7〕。对分子量10000的蛋白质用离子喷雾技术进行精确的质量测定是常规的分析。有研究用离子喷雾测定甲硫酸氨基-人体生长激素(MET-HGH)的分子量为22,256.32±0.44Dr,与实际计算分子量22,256.2Dr相差很小。同聚丙烯酰胺凝胶电泳、蔗糖密度离心法等经典的蛋白质分子量测定技术相比,分析时间短,样品消耗少,测定快捷准确。还有研究者利用LC/MS/MS开展DNA-药物结合态的分析,蛋白质与金属离子配位研究〔8〕。

司法鉴定中LC/MS/MS也是毒品检测的一个有力工具〔9〕。Soenoff建立了新生婴儿血液中苯甲酰爱康宁的确证方法,这就可以对可疑吸毒者出生的婴儿进行鉴定。Clauwean用LC/MS/MS和LC/荧光检测了头发中可卡因及其代谢物,得到的结果是一致的,并且在很低的浓度时仍可以进行MS/MS全扫描。Wang对可卡因和它的15个代谢物的裂解机理在改变CID源和标准品的条件下进行了深刻探讨,取得很大的成就。

LC/MS/MS在食品检测中的地位更是不可低估。例如蜂蜜中氯霉素的LC/MS/MS 分析,鱼肉中孔雀石绿的LC/MS/MS 分析,LC/MS/MS同时分析多种抗生素,动物组织中19种β肾上腺素兴奋剂的检测,苏丹红的LC-MS/MS方法的测定,水果和蔬菜中100种农药及其代谢物的同时检测,干炸食品中丙烯酰胺的测定。硝基呋喃是国际动物源性食品贸易的必检项目,硝基呋喃类药物主要包括呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因,用于治疗和预防由埃希氏菌和沙门氏菌引起的哺乳动物消化道疾病。研究发现,呋喃西林、呋喃唑酮及其代谢物具有致癌作用〔10〕。

1995年欧盟禁止在食用动物中使用硝基呋喃类药物, 2002年我国颁布了禁止使用该类兽药的禁令〔11〕。虽然硝基呋喃类药物代谢快而且对光敏感,母体化合物在动物体及产品中很快就降至检出限以下,但其代谢物以蛋白结合物的形式在体内可残留较长时间〔12,13〕。

目前,各国均将硝基呋喃代谢物作为指示硝基呋喃类药物残留的标示物。彭涛用高效液相色谱/串联质谱(LC/MS/MS)法同时测定奶粉中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因的代谢物。各界对此都进行了积极的研究〔14,15〕。

随着科技发展,分析领域对仪器的要求的不断提高,制药行业对0.1%含量的杂质要求定性和定量,在增加检测的选择性和灵敏度基础上得到更多化合物的信息和增加可分析化合物种类,对我们分析人员也是一种挑战。HPLC/MS/MS结合了LC的强大的分离分析能力和MS灵敏的鉴定及结构解析能力,提供了可靠、精确的相对分子质量及结构信息,简化了试验步骤,节省了样品准备时间和分析时间,作为当今最重要的分离和鉴定方法之一,在分析化学领域中发挥着更加重要的作用

了解了上面的内容,相信你已经知道在面对微透析方法学时,你应该怎么做了。如果你还需要更深入的认识,可以看看探索吧的其他内容。

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作者: 探索吧

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